骨關節(jié)結核的臨床診斷主要依據臨床表現和輔助檢查的X線片及CT片,但病原學診斷還需依賴細菌學檢驗。但因為長期應用抗結核藥物及取材、培養(yǎng)等因素,使細菌培養(yǎng)的陽性率很低,一般不超過20%,而且培養(yǎng)的時間也較長,需要3~8周隨著生物技術的發(fā)展,聚合酶鏈反應(PCR)的誕生,國外很多學者已將PCR技術應用于骨關節(jié)結核的病理診斷中,并收到了優(yōu)良效果,現已有標準的模板結核DNA及相應的引物合成試劑,應用簡單。其實驗方法為取一2mm3大小的結核組織塊加入 Mris、NaOH、SDS等制成乳劑,經煮沸、離心及苯芬***/異戊醇混合液提取,NaAC和無水乙醇沉淀后,進行PCR擴增,再于1.2g%瓊脂糖凝膠電泳,然后于紫外燈下觀察色帶。PCR擴增法檢測的是結核菌中細胞核內的D)NA,其陽性敏感率較細菌培養(yǎng)法大大提高,而且微量細菌或已被殺死細胞的LNA存在,就可以檢測出來,也就是說只要檢測物中含有結核菌的DNA,即可擴增出!DNA的特異片段。因此,檢測物中即使無活細菌或檢測物是經過固定液固定后,均不影響檢測結果。而且PCR擴增技術僅需2天就可以報告結果,大大縮短了檢測時間,為臨床診斷提供了重要依據。
由上述可見,PCR技術的應用具有敏感、快速、高效、特異等優(yōu)點,是一種在基因水平上診斷結核的技術,對各種骨關節(jié)結核的診斷和鑒別診斷具有特殊意義。