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肺癌外周血檢測可指導(dǎo)個體化治療

2014-05-20 12:39 閱讀:925 來源:轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué) 責(zé)任編輯:潘樂樂
[導(dǎo)讀] 對原發(fā)腫瘤反復(fù)進行組織活檢有時候并不方便,無論在倫理還是實際操作上均有一定難度,并且可能延誤治療和導(dǎo)致并發(fā)癥的產(chǎn)生。因此,利用外周血(游離DNA、循環(huán)腫瘤細(xì)胞等)建立實時、動態(tài)、無創(chuàng)、定量的分子檢測體系有重要的意義。目前國際上多個研究小組更多

    對原發(fā)腫瘤反復(fù)進行組織活檢有時候并不方便,無論在倫理還是實際操作上均有一定難度,并且可能延誤治療和導(dǎo)致并發(fā)癥的產(chǎn)生。因此,利用外周血(游離DNA、循環(huán)腫瘤細(xì)胞等)建立實時、動態(tài)、無創(chuàng)、定量的分子檢測體系有重要的意義。目前國際上多個研究小組更多的探尋利用外周血游離DNA或循環(huán)腫瘤細(xì)胞行全基因組/外顯子組分析以指導(dǎo)個體化治療的可行性。

    腫瘤是基因組疾病,故單一基因檢測難以滿足指導(dǎo)個體化治療的需要。近期多項研究利用二代測序技術(shù)分析了血漿游離DNA基因組、外顯子組改變與治療療效的關(guān)系。循環(huán)腫瘤細(xì)胞是有關(guān)外周血分子標(biāo)志物研究的另一焦點。其作為完整的、無損傷的腫瘤細(xì)胞,能反應(yīng)腫瘤的轉(zhuǎn)移、耐藥、進展等過程。

    在該研究中,研究人員比較了循環(huán)腫瘤細(xì)胞中基于血液KRAS突變分析和循環(huán)血漿DNA用于預(yù)測肺癌原發(fā)性腫瘤突變這兩種方法來替代組織活檢的可行性。

    研究人員通過利用cobas4800(羅氏)等位基因特異性PCR技術(shù)檢測肺癌患者KRAS突變狀態(tài),該技術(shù)的原理是在基因組的某些非編碼區(qū),一些短的序列 ( 十幾至一百多個堿基 ) 可重復(fù)多次,并按照孟德爾遺傳法則呈共顯性遺傳。這種等位基因的多態(tài)性常達(dá)十個以上,因此這種遺傳標(biāo)記帶有很大的信息量。除了等位基因的遺傳多態(tài)性分析外,還應(yīng)用于點突變的檢測。

    通常只需采集病人9ml血標(biāo)本就可以檢測,利用ScreenCell MB裝置捕獲循環(huán)腫瘤細(xì)胞,DNA通過人類組織和細(xì)胞DNA提取試劑盒(QIAGEN試劑盒)從循環(huán)腫瘤細(xì)胞中提取出。通過自定義設(shè)計的高分辨率溶解法檢測KRAS基因突變,并通過QIAGEN試劑盒進行焦磷酸測序。

    91例接受肺癌切除手術(shù)患者中,通過福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)進行組織活檢的18例,通過外周血游離DNA檢測的17例,循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測的47例。研究發(fā)現(xiàn),以血液為基礎(chǔ)檢測KRAS突變試驗中,外周血游離DNA檢測的敏感度和特異度分別為81%、97%;循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測的敏感度和特異度分別為86%、38%。

    該研究結(jié)果表明,以血液為基礎(chǔ)的突變試驗用于預(yù)測肺癌原發(fā)性腫瘤基因突變是可行的。就腫瘤異質(zhì)性而言,與循環(huán)腫瘤細(xì)胞相比,循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)對腫瘤負(fù)荷的影響更大,并且更密切說明了腫瘤的突變。


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