樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）由Steinman和Cohn于1973年首次發(fā)現(xiàn)，并使用“樹突狀”來描繪鼠脾內(nèi)一群黏附細(xì)胞的形態(tài)特征。樹突狀細(xì)胞（DC）是識(shí)別內(nèi)外抗原、調(diào)節(jié)免疫功能的關(guān)鍵因素，在機(jī)體免疫系統(tǒng)中處于中心地位，同時(shí)還在機(jī)體抗腫瘤免疫中發(fā)揮著重要作用。本文就樹突狀細(xì)胞（DC）在肝癌治療中的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀作扼要綜述。

    1  樹突狀細(xì)胞（DC）基礎(chǔ)研究現(xiàn)狀

    1.1  樹突狀細(xì)胞（DC）的分離、純化、培養(yǎng)、擴(kuò)增及鑒定
    樹突狀細(xì)胞（DC）能直接活化CD4+、CD8+ T淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生抗原特異性體液及細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)，是體內(nèi)惟一能活化初始T細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞（本文所述樹突狀細(xì)胞（DC）專指與T細(xì)胞相關(guān)的狹義樹突狀細(xì)胞（DC））。體內(nèi)樹突狀細(xì)胞（DC）分布廣、數(shù)量少，為痕量細(xì)胞群，僅占人外周血單個(gè)核細(xì)胞總數(shù)的0.5%～1.0%，且難以分離和純化。樹突狀細(xì)胞（DC）的分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增及鑒定一直是臨床進(jìn)行免疫生物治療需要解決的課題。

    1.2  樹突狀細(xì)胞（DC）與腫瘤免疫
    樹突狀細(xì)胞（DC）具有非特異性免疫效應(yīng)功能，可殺傷多種新鮮分離或培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞。樹突狀細(xì)胞（DC）的抗原遞呈是T、B細(xì)胞作用的先決條件，借助樹突狀細(xì)胞（DC）高表達(dá)的主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ、Ⅱ類分子所遞呈的腫瘤抗原肽，聯(lián)合B7-1、B7-2、CD40分子共同作用，充分激活T細(xì)胞。初始型T細(xì)胞接受樹突狀細(xì)胞（DC）遞呈的抗原后活化并增殖，促進(jìn)其在腫瘤部位聚集以執(zhí)行免疫功能。
    近年，圍繞樹突狀細(xì)胞（DC）建立的旨在增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤特異性免疫力的諸多措施已成為腫瘤生物治療的新前沿。這類措施均以增強(qiáng)樹突狀細(xì)胞（DC）對腫瘤抗原的識(shí)別、遞呈能力為核心。包括：
    （1）體外用腫瘤抗原多肽，腫瘤細(xì)胞蛋白提取物、裂解物，凋亡腫瘤細(xì)胞，已致敏樹突狀細(xì)胞（DC）的分泌物負(fù)載樹突狀細(xì)胞（DC），可顯著誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（cytotoxicity T lymphocyte，CTL）、保護(hù)性免疫效應(yīng)，并且已用于治療荷瘤模型鼠。
    （2）基因轉(zhuǎn)染：將腫瘤抗原基因?qū)霕渫粻罴?xì)胞（DC），使樹突狀細(xì)胞（DC）自身表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原，可延長免疫刺激作用時(shí)間，同時(shí)有利于抗原進(jìn)入Ⅰ類抗原遞呈途徑，誘發(fā)CTL反應(yīng)，該基因工程瘤苗制備方案頗具前景。
    （3）腫瘤mRNA：研究提示肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）mRNA可替代HCC抗原刺激樹突狀細(xì)胞（DC），誘發(fā)HCC的特異性免疫。目前，借助核酸擴(kuò)增技術(shù)從少量的腫瘤組織中即可獲取足量mRNA，再借助差異篩選等技術(shù)獲取腫瘤中特異性mRNA用于負(fù)載、激活樹突狀細(xì)胞（DC）。
    （4）細(xì)胞融合：腫瘤細(xì)胞與樹突狀細(xì)胞（DC）融合后可使腫瘤抗原表達(dá)在融合細(xì)胞上，共刺激因子作用后可直接活化初始型T細(xì)胞參與抗腫瘤效應(yīng)。張浩等使用小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞（DC）與H22肝癌細(xì)胞體外融合制備的瘤苗，能抵抗H22小鼠肝癌細(xì)胞的攻擊并誘導(dǎo)較強(qiáng)的CTL活性，能顯著促進(jìn)腫瘤組織中TNF-α、干擾素-γ表達(dá)及延長荷瘤小鼠生存期。

    2  臨床研究近況

    隨著樹突狀細(xì)胞（DC）分離、體外擴(kuò)增、培養(yǎng)技術(shù)的成熟完善，它在感染性疾病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤防止及移植排斥反應(yīng)調(diào)控等領(lǐng)域的研究蔚然興起。特別因其在增強(qiáng)機(jī)體特異性抗腫瘤免疫能力的重要作用而成為腫瘤生物治療的研究重點(diǎn)。

    近年，國內(nèi)外開展了眾多應(yīng)用樹突狀細(xì)胞（DC）治療HCC的研究。Ladhams等用自體腫瘤細(xì)胞負(fù)載樹突狀細(xì)胞（DC）治療不能切除的HCC取得明顯效果。Lee等用破裂的HCC細(xì)胞產(chǎn)物負(fù)載樹突狀細(xì)胞（DC）治療晚期HCC患者，Ⅰ期臨床試驗(yàn)效果良好。Chi等發(fā)現(xiàn)常規(guī)放療結(jié)合瘤內(nèi)注射過繼免疫樹突狀細(xì)胞（DC）治療難治性HCC，呈現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。Kuang等將甲醛固定的自體HCC細(xì)胞負(fù)載樹突狀細(xì)胞（DC）后用于預(yù)防術(shù)后復(fù)發(fā)的Ⅱ期隨機(jī)臨床試驗(yàn)，其效果較對照組顯著。

    近年，用AFP基因轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞（DC）制備AFP-樹突狀細(xì)胞（DC）腫瘤疫苗，成功誘導(dǎo)出AFP特異性CTL，對表達(dá)AFP的癌細(xì)胞呈現(xiàn)出特異性的殺傷。但正常機(jī)體內(nèi)AFP也有低表達(dá)，有引發(fā)自身免疫性疾病的可能。應(yīng)用AFP負(fù)載樹突狀細(xì)胞（DC）的臨床Ⅰ、Ⅱ期HCC治療試驗(yàn)已于2006年在美國匹茲堡完成，效果良好。最近，一項(xiàng)應(yīng)用人類白細(xì)胞抗原-A24+限制性T細(xì)胞表位誘導(dǎo)針對AFP特異性CTL的試驗(yàn)表明，新證實(shí)的AFP抗原表位可作為HCC免疫治療的高效靶點(diǎn)，為應(yīng)用樹突狀細(xì)胞（DC）進(jìn)行免疫治療HCC提供了新靶標(biāo)。

    另外，HCC患者M(jìn)AGE-A基因族總的異常表達(dá)率高達(dá)86%，以MAGE-1、3修飾的基因工程樹突狀細(xì)胞（DC）在體外誘導(dǎo)出對人HCC細(xì)胞株很強(qiáng)的細(xì)胞毒作用，可作為腫瘤疫苗用于治療HCC。葉勝龍等以MAGE-1、IL-12、fms樣酪氨酸激酶受體3配體、IL-18等基因修飾樹突狀細(xì)胞（DC）并體外誘導(dǎo)出較強(qiáng)的對HCC細(xì)胞特異性殺傷，提示其可望作為一種新型瘤苗在HCC防止中應(yīng)用。Nakamoto等將自體外周血獲得的樹突狀細(xì)胞（DC）體外擴(kuò)增后行導(dǎo)管肝動(dòng)脈栓塞術(shù)回輸，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樹突狀細(xì)胞（DC）在瘤周及瘤體內(nèi)部存在達(dá)17 d之久，并伴單核及淋巴細(xì)胞的浸潤，臨床并未見任何血清學(xué)及自身免疫不良反應(yīng)的依據(jù)，充分證實(shí)樹突狀細(xì)胞（DC）回輸方案的安全、高效，展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。Evdokimova等發(fā)現(xiàn)健康人體內(nèi)AFP特異性CD4+ T細(xì)胞反應(yīng)率較低且為Th1型淋巴細(xì)胞，該類細(xì)胞在HCC中含量很低。為更好激活此類細(xì)胞，他們選擇AFP蛋白與AdVh-AFP工程樹突狀細(xì)胞（DC）進(jìn)行，結(jié)果證實(shí)AdVh-AFP工程樹突狀細(xì)胞（DC）較普通抗原遞呈細(xì)胞甚至可溶性AFP負(fù)載過的樹突狀細(xì)胞（DC）的抗原遞呈能力更強(qiáng)，為臨床治療提供了很好的研究方向。

    國內(nèi)近年圍繞樹突狀細(xì)胞（DC）開展的基礎(chǔ)性研究亦很多。張毅等發(fā)現(xiàn)HCC中存在較高比例的P120ctn異常表達(dá)，且與HCC的浸潤和轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。這提示可將P120ctn負(fù)載體外擴(kuò)增的樹突狀細(xì)胞（DC）并回輸對肝癌進(jìn)行治療。謝斌等證實(shí)了c-met、E-鈣黏蛋白、β-連環(huán)蛋白在HCC侵襲轉(zhuǎn)移中的作用，為將上述蛋白負(fù)載樹突狀細(xì)胞（DC）后對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的控制提供了良好思路。大量研究表明：HCC的免疫治療利用樹突狀細(xì)胞（DC）遞呈腫瘤抗原可明顯誘導(dǎo)抗腫瘤的CTL，臨床效果良好且無明確副作用，基于樹突狀細(xì)胞（DC）構(gòu)建的腫瘤疫苗已經(jīng)成為理想的治療肝癌的免疫輔助療法。

    3  結(jié)語與展望

    隨著惡性腫瘤抗原的逐步明確，治療性的樹突狀細(xì)胞（DC）腫瘤疫苗將成為研究重點(diǎn)。免疫療法的關(guān)鍵是針對腫瘤表達(dá)的特定系列蛋白，特異地消除腫瘤。涉及樹突狀細(xì)胞（DC）的各種免疫激活策略充分展示了其在HCC治療方面的生物效能。綜合分析發(fā)表的試驗(yàn)數(shù)據(jù)：大部分方案均有良好的臨床應(yīng)用前景。隨著制約免疫療效因素的解決、基因工程疫苗應(yīng)用的方興未艾，在今后更標(biāo)準(zhǔn)化的治療中，樹突狀細(xì)胞（DC）必將隨其在HCC免疫治療方面所占據(jù)的主體角色的日臻完善而發(fā)揮更大的臨床效應(yīng)。