研究要點(diǎn)：

    結(jié)直腸癌中miR-212表達(dá)缺失與結(jié)直腸癌惡性程度及患者預(yù)后不良密切相關(guān)。miR-212的高表達(dá)在體內(nèi)外均可有效抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。

    MnSOD為miR-212直接調(diào)控的靶基因。MnSOD高表達(dá)可發(fā)揮促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞上皮間質(zhì)化轉(zhuǎn)變的作用。

    在結(jié)直腸癌中，因存在雜合性缺失及啟動子區(qū)高甲基化而導(dǎo)致miR-212的表達(dá)下調(diào)。這一結(jié)果提出了結(jié)直腸癌發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的新機(jī)制。miR-212與MnSOD之間相互作用有潛力成為治療結(jié)直腸癌的新靶點(diǎn)。
 

    眾所周知，影響microRNA分子的功能與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。miR-212是由一個非蛋白編碼基因的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄而來的。研究報道m(xù)iR-212在多種腫瘤中存在表達(dá)下調(diào)。中山大學(xué)孫逸仙腫瘤研究中心華南腫瘤學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室XiangqiMeng等人探究了miR-212在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展過程中的可能機(jī)制。

    作者采用實(shí)時定量PCR的方法檢測了miR-212在不同結(jié)直腸癌細(xì)胞株和180對結(jié)腸癌組織及其配對癌旁正常組織中的表達(dá)。在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中過表達(dá)和敲除miR-212的表達(dá)，在體外實(shí)驗(yàn)中檢測其功能。利用在HCT116細(xì)胞株中過表達(dá)miR-212后，研究該細(xì)胞株在裸鼠成瘤中的作用以及其影響侵襲轉(zhuǎn)移的能力。

    體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，過表達(dá)miR-212可以抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移，并減少肝內(nèi)和肺轉(zhuǎn)移的形成。進(jìn)一步鑒定發(fā)現(xiàn)MnSOD（錳超氧化物歧化酶）的信使RNA是miR-212直接調(diào)控靶基因。蛋白水平在結(jié)直腸癌組織樣本中觀察到miR-212的表達(dá)與MinSOD的表達(dá)成負(fù)相關(guān)。

    MnSOD在結(jié)腸癌細(xì)胞中是參與下調(diào)上皮標(biāo)志物表達(dá)而上調(diào)間質(zhì)標(biāo)志物表達(dá)的酶類，也就是說MnSOD可促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。而過表達(dá)miR-212可以下調(diào)MnSOD的表達(dá)而阻斷上皮間質(zhì)化的進(jìn)程。雜合性缺失和啟動子區(qū)高甲基化是導(dǎo)致結(jié)腸癌中miR-212下調(diào)的原因。miR-212表達(dá)下調(diào)的結(jié)腸癌侵襲性表型程度越高，miR-212低表達(dá)結(jié)腸癌患者的無病生存時間也越短（P=.0045;overallsurvival,P=.0015）。

    該項(xiàng)研究表明miR-212通過遺傳學(xué)及表觀遺傳學(xué)的因素在結(jié)直腸癌患者腫瘤組織中表達(dá)下調(diào)。miR-212可能通過靶向調(diào)節(jié)MnSOD的mRNA的活性來影響其表達(dá)，達(dá)到預(yù)防腫瘤進(jìn)展的作用。miR-212表達(dá)下調(diào)具有成為結(jié)直腸癌患者預(yù)后標(biāo)志物的潛質(zhì)。miR-212和MnSOD也有可能成為腫瘤的治療靶點(diǎn)。

研究背景：

    結(jié)腸癌是世界常見惡性腫瘤。大部分出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌患者無法接受手術(shù)治療，其5年生存率不足10%?；谶@一現(xiàn)狀，找出結(jié)直腸癌高侵襲轉(zhuǎn)移表型及明確哪些人群發(fā)生的基因改變和特異分子作用機(jī)制易導(dǎo)致結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移是十分必要的。

    microRNA是一類內(nèi)生的、長度約為20-24個核苷酸的小分子RNA，其再細(xì)胞內(nèi)具有多種重要的調(diào)節(jié)作用。microRNA通過與靶mRNA的3’-非編碼區(qū)完全或不完全配對結(jié)合調(diào)控靶基因mRNA活性，發(fā)揮影響蛋白表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)作用。microRNA分子調(diào)控至少30%的基因及相關(guān)信號通路參與多種人體生物過程及疾病發(fā)生。但microRNA在結(jié)腸癌中的分子機(jī)制尚不清楚。

    miR-212屬于miR-212/132家族，其編碼基因是一種在脊椎動物中高度保守的非蛋白編碼基因的內(nèi)含子。研究表明miR-212在肺癌、非小細(xì)胞型肺癌、胃癌等多種腫瘤中低表達(dá)，發(fā)揮腫瘤抑制基因的作用。也有研究表明miR-212可以作為獨(dú)立影響因素與急性髓細(xì)胞白血病患者預(yù)后相關(guān)，暗示miR-212在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。但miR-212在結(jié)直腸癌發(fā)生及進(jìn)展中的作用機(jī)制尚無相關(guān)研究。

    大量證據(jù)表明，細(xì)胞癌變與內(nèi)環(huán)境中活性氧物質(zhì)刺激發(fā)生的氧化應(yīng)激有關(guān)，提示抗氧化酶在癌變過程中可能發(fā)揮著重要作用。MnSOD為抗氧化酶家族成員，定位于染色體基質(zhì)中。在線粒體中可將O2-轉(zhuǎn)換為H2O2及O2，發(fā)揮保護(hù)線粒體的作用，但其與腫瘤的相關(guān)性尚無具體研究。

    有文獻(xiàn)證實(shí)，MnSOD具有雙重作用。外源性MnSOD可在某些實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤模型中發(fā)揮抑癌作用，另一方面也有研究指出MnSOD可通過抗凋亡及激活MMP2發(fā)揮促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的作用。此外MnSOD在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及作用尚存爭議，進(jìn)一步研究其在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用機(jī)制有著重要意義。